زمینه مطالعاتی: روغن حیوانی به دلیل ارزش تغذیه ای بالا و طعم و رایحه بسیار غنی در میان تمام محصولات شیر جایگاه ویژه ای دارد. هدف: هدف از این پژوهش، ارزیابی ویژگی های شیمیایی، میکروبی و ترکیب اسیدهای چرب نمونه های روغن شیر آذربایجانی و کرمانشاهی بود. روش کار: نمونه های روغن حیوانی با استفاده از شیر گاو دامداری های سنتی ارومیه و کرمانشاه در کارگاه های محلی تولید شدند. خصوصیات میکروبی و ترکیب اسیدهای چرب نمونه ها پس از تولید و عدد پراکسید، عدد اسیدی و اسیدیته آنها در طول 6 ماه نگهداری در دمای محیط (C° 25) مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: اسیدیته، عدد اسیدی و پراکسید هر دو نمونه روغن در طول 6 ماه نگهداری در دمای محیط به طور معنی داری افزایش پیدا کرد (05/0>p). در ماه ششم دوره نگهداری، عدد پراکسید روغن زرد آذربایجانی و روغن کرمانشاهی از صفر به meqO2/Kg 39/0 و meqO2/Kg 38/0 به ترتیب افزایش پیدا کرد. پروفایل اسیدهای چرب نشان داد در هر دو نمونه روغن، پالمیتیک اسید، میریستیک اسید و استئاریک اسید، اسیدهای چرب اشباع غالب و اولئیک اسید، اسید چرب غیراشباع عمده را تشکیل می داد. بارکلی میکروبی در نمونه روغن زرد آذربایجان و روغن کرمانشاهی به ترتیب log10 CFU/g 76/0 و log10 CFU/g 32/1 بود. نتایج جستجو و شمارش کلی فرم ها، استافیلوکوکوس اورئوس کوگولاز مثبت و کپک و مخمرها در نمونه های روغن حاکی از عدم آلودگی نمونه های روغن به این میکروارگانیسم ها بود. نتیجه گیری نهایی: یافته های این تحقیق حاکی از افزایش میزان اسیدهای چرب آزاد و کاهش پایداری اکسایشی نمونه های روغن حیوانی در طول دوره نگهداری در دمای C° 25 بود و این امر در روغن زرد آذربایجان مشهودتربود.